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检测试剂和目标蛋白质元件之间的非特异性蛋白质相互作用可能会导致不需要的背景染色。为了最大限度地减少这种类型的相互作用，请使用适当的蛋白质封闭试剂：正常血清—广泛用作组织和细胞染色中的通用蛋白块。为了获得最佳结果，请选择与二抗种类相匹配的用于封闭的血清种类。无碳封闭液(SP-5040)–用于凝集素染色或用于多重IHC应用。凝集素用于至少一种标记，因为该溶液不含干扰糖蛋白。BSA(SP-5050)—我们的BSA不含其他等级BSA中存在的糖蛋白和杂质，并且可能会引入伪影或增加背景染...

一、邻位连接适用的最短和最长距离是多少？所有的Duolink®PLA产品都是被设计用于邻位检测的。当使用二抗方法时，理论上在两种靶标蛋白（表位）间产生信号的最长距离为40nm。这些数据是基于抗体的平均直径约为10nm而计算出来的。Duolink®PLA理论上可检测距离在0nm之内的两个表位，只要两种单抗可发生结合并且不存在位阻。二、Duolink®PLA产品或试剂可持续多久？1.检测试剂盒中的所有试剂必须总是被保存在-20°C。这一点对于连接酶和聚合酶...

建议及技巧：用于蛋白检测的Duolink®PLA技术可提供一种具有一系列明确定义步骤的简易而直接的实验方法。该章节将会对可确保Duolink®PLA实验顺利进行的一些重要注意事项进行描述。一、前期考虑：1.采用在待测样品内可具有最佳一抗性能的条件。这些条件包括样品处理参数（固定、通透化、抗原修复等）、一抗效价以及孵育时间。2.为了可对结果进行正确的评估，在实验中总是需要设置技术及可用的生物学对照。3.Duolink®PLAControlKit是一款可对...

Duolink®PLA结果为蛋白质事件（表达、相互作用或修饰）提供了相对定量。因此，加入技术对照组，以及在可能的情况下加入生物对照组，是十分重要的。技术对照：每个Duolink®PLA实验中应该包含两个技术对照组。这包括：1.分别省略一种一抗用于检测每种一抗的非特异性结合有助于确定最佳一抗效价2.省略所有一抗用于检测系统中Duolink®PLA探针的非特异性结合生物对照：除了技术对照外，强烈建议使用生物对照。阳性和阴性生物对照均可提供有价值的信息。1....

一、样品选择对样品和蛋白质靶标的已有了解十分重要。选择具有已知靶蛋白表达的系统将显著增加Duolink®PLA实验成功的几率。Duolink®PLA实验所需的样本与用于传统免疫荧光(IF)、免疫组织化学(IHC)或流式细胞术的样本相同。因此，Duolink®PLA试剂适用多种样品类型，包括：1.贴壁细胞2.悬浮细胞3.血细胞4.细胞离心涂片制剂5.石蜡包埋细胞样品6.石蜡包埋组织切片7.冰冻组织切片8.新鲜组织切片在进行Duolink®PLA实...

要成功地执行Duolink®PLA实验，实验方案中有一些必要的考虑因素需要正确地准备、设置和执行。Duolink®PLA产品可用于荧光和明场。荧光Duolink®PLA试剂可用于显微镜和流式细胞术应用。一、实验设计要设计一个成功的Duolink®PLA实验，必须考虑很多因素。这些因素包括但不限于：1.确定蛋白质靶标和实验类型2.选择样品（细胞或组织）3.设计您的读出方案4.设计实验对照（技术和生物）靶标识别：首先要确定的是目标蛋白靶标。是单一蛋...